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    關于TnA家族的轉座子的介紹

    2022.11.11

      轉座子(transposon,Tn)另一家族是TnA,長約5kb左右,兩端具有IR,而不是IS,中部的編碼區不僅編碼抗性標記,還編碼轉座酶和解離酶。

      TnA是復制轉座的轉座子。在此家族中Tn3和Tn1000(γδ)研究得最深入。通常末端有38bp左右的IR,在兩個IR中任一個順式作用缺失都會阻止轉座。5bp的正向重復是靶位點產生的。它們都帶有抗性標記(圖23-33)。

      TnpA介導轉座分為兩步,分別由tnpA,、tnpR編碼的轉座酶(transposase)和解離酶(resolvase)來完成的。這兩個酶是通過實變鑒別出來的。此類轉座和末端的IR有關。解離順序(res)是內部的特殊位點,只有TnA家族才具有這一位點。

      tnpA突變體是不能轉座的,這個基因的產物是一種轉座酶。它可以結合在末端38bpIR中的25bp的序列上。E.coliIHF的結合位點就在轉座酶結合位點附近(在靶位點附近)。而轉座酶結合和IHF的結合是協同性的。轉座酶識別末端重復序列,并可以使靶DNA產生5bp的交錯切割使轉座子插入。IHF是一種DNA結合蛋,常在E.coli中組裝成一個大分子,它在轉座反應中并不起作用。

      tnpR的產物具有雙重功能,一是作為基因表達的阻遏物,另一個作用是具有解離酶的功能。tnpR突變將增加轉座預率,這是由于TnpR阻遏了tnpA和它自己的基因轉錄,TnpR蛋白失活就使TnpA合成增多,結果增加了轉座的頻率。這表明TnpA轉錄酶的數量一定是轉座的限制因子。

      tnpA和tnpR基因之間有一個富含A-T的內部順式控制區,TnpR的兩種功能就是通過和此區的結合來實現的。

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