凝膠的分辨能力的影響因素
凝膠的分辨能力同凝膠的類型和濃度有關,瓊脂糖凝膠分辨DNA片段的范圍為0.2~50kb,而聚丙烯酰胺凝膠的分辨能力要高一些,能夠分辨較小分子質量的DNA片段,其分辨范圍為1~1000bp。
凝膠濃度的高低影響凝膠介質孔隙的大小,濃度越高,孔隙越小,其分辨能力也就越強;
反之,濃度降低,孔隙就增大,其分辨能力也就隨之減弱。
例如,20%的聚丙烯酰胺的分辨力可達1~6bpDNA小片段,而要分離1000bp的大DNA片段,則要用3%的聚丙烯酰胺的凝膠。2%的瓊脂糖凝膠可分辨小到300bp的雙鏈DNA分子,而對于較大片段的DNA,則要用低至0.3%~1.0%的瓊脂糖凝膠。
推薦