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    哺乳動物細胞基因突變試驗

    2022.4.11

      哺乳動物體外培養細胞的基因正向突變試驗常用的測試系統有小鼠淋巴瘤L5178Y細胞,中國倉鼠肺V79細胞和卵巢CHO細胞的三個基因位點的突變,即次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位點。HGRPT和Na+/K+ATP酶位點突變可用于上述三種細胞,OUA位點突變僅適用于CHO細胞,HGRPT和TK可分別使6-硫代鳥嘌呤(6-TG)轉移上磷酸核糖及使5-溴脫氧尿苷磷酰化,它們的代謝產物可摻入DNA引起細胞死亡,因此正常細胞在含有這些鹼基類似物的培養基中不能生長,在致突變物作用下此兩個位點發生突變的細胞對這些鹼基類似物具有抗藥性,可以增殖成為克隆(細胞集落)。Na+/K+ATP酶是細胞膜上的Na+/K泵,鳥本苷可抑制此酶活性引起細胞死亡,當致突變物引起該位點突變后,Na+/K+ATP酶對鳥本苷的親和力下降,而酶活性不變,故對培養基中的鳥本苷產生抗藥性,并可增殖為克隆。

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