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    生化檢測項目--淚液乳酸脫氫酶介紹

    2022.2.17

    淚液乳酸脫氫酶介紹:

      淚液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要來自眼角膜上皮。它們在淚液中的濃度約為血清中該酶濃度的20倍。淚LDH主要含M亞基,以LDH5和LDH4含量最高。淚液MDH同工酶,用醋纖膜電泳,可分離出MDHs和MDHm,健康人淚液以MDHs為主。

    淚液乳酸脫氫酶正常值:

      LDH: 1.29-9.02U/L
      LDH同工酶:LDH1 0.66±0.51%
      MDH活性: 0.25-2.2U/L
      MDH同工酶:MDHs 80%-98.1%
      以MDHm>20%為異常
      LDH/MDH:<69歲者3.96±0.7
      >70歲者4.55±0.51

    淚液乳酸脫氫酶臨床意義:

      異常結果:在細菌性角膜潰瘍和角結膜化學傷時,淚LDH和MDH活性下降。凡角結膜上皮損傷,LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高,但MDHm更能反映角膜組織損害的情況和病變程度。如在角膜潰瘍和可疑干性角結膜炎(KCS),MDHm升高而淚LDH的H/M比值卻無顯著變化。
      淚LDH同工酶和LDH/MDH比值的測定有助于沙眼和慢性結膜炎的鑒別診斷。兩者淚液LDH的H/M比值均明顯下降,但沙眼時,淚液LDH/MDH比值無變化,而且LDH的M亞基升高更顯著。
      需要檢查人群:角膜疾病的診斷。

    淚液乳酸脫氫酶注意事項:

      不合宜人群:一般無特殊人群。
      檢查前禁忌:用手揉眼睛,這樣會使眼睛感染,加重病情,影響檢查效果。
      檢查時要求:配合醫生指示做好相關檢查。

    淚液乳酸脫氫酶檢查過程:

      (1)比色法:
      ① 乳酸鉀、乳酸鈉也可作為LDH底物,但因其為水溶液,含量不夠準確,且保存不當易產生酮酸類物質,抑制酶促反應。而乳酸鋰為固體,穩定,易于稱量。
      ② 除二乙醇胺緩沖液外,也可用Tris或焦磷酸緩沖液,避免了原金氏法中甘氨酸緩沖液對LDH的抑制作用,提高了陽性檢出率。
      ③ 比色應在5-15min內完成,否則吸光度降低。
      ④ 結果>2500U時,可用生理鹽水稀釋標本后再測,其結果乘以稀釋倍數。
      (2)連續監測法:
      ① 標本勿溶血,當溶血達Hb 0.8g/L時,LDH活性可升高58%。
      ② 標本于室溫(25℃)保存,2天內酶活性穩定,冰箱保存酶活性降低,-20℃過夜LDH3、LDH4則全部失活。
      ③ 用血清或肝素抗凝血漿測定結果滿意,草酸鹽可抑制LDH活性。
      ④ 復溶后溶液變濁或初始吸光度>0.5應棄去。
      ⑤ 利用正逆雙向反應均可測定乳酸脫氫酶活性,但因反應溫度、底物和緩沖液濃度不同,其參考區間也有差異。以乳酸和NAD為底物,在340nm監測吸光度增高速率為正向反應,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH為底物,監測340nm吸光度下降速率為逆向反應,以LD-P表示。正逆反應兩法相比,LD-L法的主要優點是:A.正向反應底物液的穩定性比逆向反應的穩定性大,前者冰箱可保存6個月以上,而后者僅幾天;B.速率反應的線性范圍(吸光度對監測時間t作圖)較寬;C.重復性比LD-P好。由于逆向反應速度比正向反應速度快,其參考值約為LD-L的2倍。

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      流行性出血性結膜炎,視網膜母細胞瘤

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