分子生物學實驗室的常規儀器設備及有關操作（二）

（六）超凈工作臺：內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備，是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅動空氣，經過低、中效的過濾器后，通過工作臺面，使實驗操作區域成為無菌的環境。超凈臺按氣流方向的不同大致有幾種類型：
?①側流式：凈化后氣流，從左側或右側通過工作臺面，流向對側，或者從上往下或從下往上流向對側，他們都能形成氣流屏障而保障臺面無菌。
?缺點：在凈化氣流和外邊氣體交界處，可因氣體的流向而出現負壓，使少量的未凈化氣體混入，而造成污染。
?②外流式：氣流是面向操作人員的方向流動，從而保證外面氣體不能混入。
?缺點：在進行有害物質實驗時，對操作人員不利，但可采用有機玻璃把上半部分遮擋起來，使氣流往下方流出。

（七）電泳系統：電泳技術是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。核酸和蛋白質等都帶有電荷，當它們被置于電場中時，能夠移動。
?電泳裝置由兩部分組成：電源裝置和電泳槽裝置。
?① 電泳裝置：電源需經穩流通過穩壓器，既能提供穩定的直流電，又能輸出穩定的電壓。可用于三種：
?常度穩壓電泳儀：輸出電壓0-500v 0-15mA
?中度穩壓電泳儀：輸出電壓400-1000v
?高度穩壓電泳儀：輸出電壓1000以上的電源裝置。
?② 電泳槽裝置：分兩種
?水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽
?垂直式電泳槽：分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。

（八）PCR儀：Polymerase Chain
?Reaction儀，也稱DNA熱循環儀，基因擴增，它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側，從而酶促合成拷貝數百萬倍的靶序列DNA片段，它的每一循環包括在三種不同溫度進行的DNA變性，引物復性，DNA聚合酶催化的延伸反應三個過程。

（九）凝膠成像分析系統:
?對電泳后含溴乙錠（EB）核酸樣品的觀察分析。

?（十）干燥設備： 3
?1. 真空加熱干燥箱：核酸在硝酸纖維素膜和尼龍膜上固定，用于雜交實驗。
?2. 電泳凝膠干燥箱：電泳后的凝膠進行脫水干燥的儀器，一般可將凝膠干燥到一些玻璃紙上，干燥后的凝膠易于保存。
?3. 液氮冷凍干燥：適用于活性蛋白質樣品的干燥與結晶。
?4. 真空泵：許多實驗都需要抽真空。如：乙醇沉淀后核酸樣品的干燥，電泳凝膠的干燥等。

?（十一） 其他
?1. 微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。
?2. 制冰機：用于制造大多數核酸、蛋白質的實驗操作所需的低溫環境，以減少核酸酶或蛋白質酶的水解。
?3. 層析裝置：（色譜分離）是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
?真空印記系統，DNA合成/測序儀：這些都是對核酸進行深入研究的必備儀器。
?4. 磁力攪拌器：多角度旋轉混勻器、快速振蕩混合器：用于混合儀器。
?5. 組織勻漿器：超聲組織及細胞破碎器，用其進行樣品的分離提純實驗。
?6. 通風櫥：很多溶劑能逸出毒氣，必備柜 ，放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。
?7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機溶劑的蒸餾。
?8. Tip頭、Eppendorf管：
?微管移液器tip頭（吸液尖）、Eppendorf管（微量離心管）可洗滌，硅化消毒后反復使用。對一些要求嚴格的實驗，如RNA的提取、保存等操作，應使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應備有常用規格的離心管（1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養塑料平板等。
?9. 小型設備、用具：
?定時器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規的玻璃或塑料器皿（包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等）、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等）

?二、本期實驗所用主要儀器、 設備的功能及操作
?1. 酚的重蒸餾裝置：空氣冷凝式玻璃蒸餾器。
?一般酚是無色透明的結晶，如呈粉色或黃色，表明其中含有酚的氧化產物，如醌、二酸等，變色的酚不能用于實驗，因其中的酚氧化物可破壞核酸的磷酸二酯鍵，并引起DNA鏈的交聯。使用前必須在160℃-180℃重蒸餾以去除能引起RNA和DNA斷裂和交聯的污染雜質，從而得到純凈的酚。
?2. 磁力攪拌器：81-2型恒溫磁力攪拌器
?將導電溫度表用導線與二芯插頭連接，插入后面的溫度表孔內，當溫度上升到預先調整好的度數時即自動停止加熱（控溫攪拌）。主要用于物質的快速攪拌、溶解和混勻。如配制試劑，制備酚的水飽和液等。
?3.
?蒸餾水器：1810B自動雙重純水蒸餾器，石英管加熱式，本器的一次及二次蒸餾均有保護裝置，使用安全可靠，熱繼電器當冷卻水突然中斷或缺水的情況下，即自動切斷電源。干簧繼電器控制二次蒸餾瓶內的水位，其高度應以在水位降低時能自動切斷電源為準，從而達到自動控制水位的目的。
?該儀器主要用于制備雙蒸水和三蒸水。
?4. 離心機：TGL-16G臺式高速離心機，最大轉速20000rpm，主要用于核酸提取時蛋白質的沉淀和有機相與水相的分層，PCR檢測的瞬時離心。
?5. 微量取液器：主要用于精確量取微量液體體積和核酸水相的轉移。
?6. 勻漿器：5ml、10ml玻璃勻漿器。
?主用于組織細胞的破碎。
?7. 凝膠成像分析系統
?主用于核酸樣品瓊脂糖凝膠和PCR電泳結果的紫外觀察和照像。
?8. PCR儀：PTC-200基因擴增儀
?體外擴增核酸的儀器
?9. 蒸汽消毒鍋：用于實驗用試劑、器皿、用具等的滅菌清毒
?有電加熱式、電爐加熱式兩種。
?10. 超凈臺：JJT-1300型潔凈工作臺，側流式。
?原理：吸進氣經過初、中級過濾皿（無紡布濾過）后，再通過風機經高級過濾器（超細玻璃纖維濾紙制成）而形成潔凈空氣。主要是在局部空氣造成潔凈空氣環境，以使工作區域中的懸浮粒子及微生物控制在最低限度內。
?本臺操作壓為垂直層流壓，因此出風面與操作位置不應放置多余的物品，以免妨礙氣流的正常流動，影響潔凈度，臺面板上的孔作為通風孔，使用時避免有液體或其他物品漏入空中，以免影響內部構件。風速可調。
?使用：75%乙醇消毒2-3次，擺放好實驗用品。插上電源，紫外消毒30分鐘，啟動風機5m后關燈，關燈后10分鐘打開照明燈，即可使用。
?11. 電泳系統：
?①電泳儀：HV-3000型高度三恒多用電泳儀（恒壓、恒流、恒功率）
?②電泳槽：水平式兩種。
?12．微波爐：主要用于瓊脂糖的快速溶解。