全自動生化分析儀用于HiCN法HGB的測定及其評價
HiCN法測定血紅蛋白(HGB)是國際血液學標準化委員會推薦的參考方法。其測定原理是：HGB被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白后，再與氰離子結合形成穩定的氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)，在540 nm波長處HiCN具有特異的吸收峰，可用分光光度計進行測定［1］。但當標本量較大時，用分光光度計比色卻相當費時。為此我們通過試驗，在自動生化分析儀上實現了檢測自動化。
1? 材料與方法
1．1? 材料
1．1．1? 標本?
采自溫州市某重點小學1年～6年級共1 400名學生。
1．1.2? 儀器?
采用日立7170A全自動生化分析儀及希斯美康SE-9000五分類血液細胞分析儀和原裝試劑。血液細胞分析儀采用新鮮血校準品進行校準。
1．1．3? 試劑?
血紅蛋白轉化液即HiCN試劑原液(濃10倍)。
??? 1．2? 方法
1．2．1? 標本準備?
HiCN試劑原液0．5 ml，加末梢指血20 μl混勻，并將此溶血液作為待測標本，上生化分析儀進行測定。
1.2．2? 儀器準備?
7170生化儀參數設置：一點終點法，波長546 nm，標本量(即以上溶血液)12 μl，試劑量(試劑即為蒸餾水)200 μl；標準品：將SE-9000所測HGB濃度為160 g／L的血液標本，按上述1.2.1法進行準備，以HiCN試劑原液為空白進行定標。
1．2．3? 線性試驗?
取一高HGB濃度的EDTA抗凝血標本，分別吸取20 μl、15 μl、10 μl、5 μl加入到0．5 ml HiCN試劑原液中，配成4／4、3／4、2／4、1／4四個濃度梯度的標本，每個濃度做3管，用7170生化儀測定。
1．2．4? 對照試驗?
取SE-9000所測不同HGB濃度的10個標本，在7170生化儀上測定。
2? 結果
2．1? 線性試驗?
本法HGB濃度在65 g/L~240 g／L范圍線性良好，結果見圖1(r=0.997 9)，其回歸方程：Y=232．4X+13．833。
2．2? 對照試驗?
10例不同HGB濃度標本經與SE9000比較，結果見圖2，其回歸方程：Y=0．7 795X+26．693，r=0．9 905。
2．3? 膿度范圍?
用本法測定1 400名小學生HGB濃度范圍為(128．28±13．29)g/L，剔除3 s后為(128．31±12．22)g/L。
3? 討論
HiCN法檢測HGB是國際血液學標準化委員會推薦的基準方法。其測定步驟是：在常規的HGB測定過程中，HiCN原液首先進行10倍稀釋，然后取其5 ml用于對標本的檢測。當20 μl末梢血液加入后，HGB很快被轉化成檢驗地帶網高鐵血紅蛋白并與氫離子結合形成穩定的HiCN，用分光光度計測定540 nm波長的HiCN吸光度即可計算其HGB濃度［1］，但在大批量的HGB普查中，手工比色、結果計算等均較繁瑣，不僅勞動強度大，而且容易出錯。而血液細胞分析儀測定HGB，雖然解決了自動化問題，但檢測速度仍然不能如愿。為此，我們分析了全自動生化分析儀用于HiCN法HGB測定的可行性。
從線性試驗和對照試驗可以看出，7170生化儀用于HGB測定在65 g/L~240 g/L濃度范圍內線性良好，其與SE-9000所測HGB結果一致(r=0．997 9)，因此認為：用生化儀進行HiCN測定不僅實現了比色和計算的自動化，而且極大的提高了工作效率。我們用不到2 h的時間完成了1 400例標本的檢測，并取得令人滿意的結果。
