谷胱甘肽的DTNB比色法測量的介紹

　　原理：DTNB與谷胱甘肽的巰基反應生成黃色的5 ?-硫代 ?-2 ?-硝基苯甲酸，在412 nm波長處有最大吸收峰，而DTNB在400nm以上幾乎沒有吸收峰。向含有谷胱甘肽的試樣中加入少量的DTNB，將反應液在412 nm處測定吸收值，根據吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量 。

　　方法步驟：

　　1、DTNB貯存液配制：將0.01 mol/L的DTNB溶解于0.05 mol/L的磷酸緩沖液（pH7.0）中形成DTNB貯存液? 。

　　2、DTNB分析液配制：將DTNB貯存液用0.5 mol/L、pH8.0的Tris ?-HCl緩沖液稀釋100倍，配成DTNB分析液，避光放置，現配現用。

　　3、操作步驟：取谷胱甘肽標準品溶液或待測樣品溶液（0.1 ~ 3.0 mol/L）0.5 mL，加入到1.5 mL濃度為0.15 mol/L的NaOH溶液中，再加入3%的甲醛溶液05mL，在pH8.0、25℃下反應2 min，反應結束后，取反應液0.5 mL加入DTNB分析液，在25℃下反應5 min，于波長412 nm下測定吸收值。根據兩者的吸光度，計算差值，代入標準曲線，計算出谷胱甘肽的含量。