微生物實驗室常見20種培養基配方匯總(二)
? 十一、營養瓊脂
成分:
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化鈉5g
瓊脂15~20g
蒸餾水1000mL
制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。
注:此培養基可供一般細菌培養之用,可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。
十二、營養肉湯
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分裝燒瓶,每瓶225 mL ,121℃高壓滅菌15min。
十三、緩沖蛋白胨水(BP)
成分:
蛋白胨 10g
氯化鈉 5g
磷酸氫二鈉 9g
磷酸二氫鉀 1.5g
蒸餾水1000mL
pH 7.2
制法:按上述成分配好后以大燒瓶裝,121℃高壓滅菌15min。臨用時無菌分裝每瓶225mL。
注:本培養基供沙門氏菌前增菌用。
十四、EC肉湯
成分:
胰蛋白胨 20g
3號膽鹽(或混合膽鹽)1.5g
乳糖 5g
磷酸氫二鉀 4g
磷酸二氫鉀 1.5g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000mL
制法:將上述成分混合,溶解后,分裝有發酵倒管的試管中,121℃高壓滅菌15min。最終pH為6.9±0.2。
十五、四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)
基礎培養基
多胨或眎胨 5g
膽鹽 1g
碳酸鈣 10g
硫代硫酸鈉 3g
蒸餾水 1000mL
碘溶液
碘 6g
碘化鉀 5g
蒸餾水 20 mL
制法:將基礎培養基的各成分加入蒸餾水中,加熱溶解,分裝每瓶100mL。分裝時應隨時振搖,使其中的碳酸鈣混勻,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時每100mL基礎培養基中加入碘溶液2mL,,0.1%煌綠溶液1mL。
十六、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)
成分:
蛋白胨 5g
乳糖 4g
亞硒酸氫鈉 4g
磷酸氫二鈉 5.5g
磷酸二氫鉀 4.5g
L-胱氨酸 0.01g
蒸餾水 1000mL
1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法:稱取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氫氧化鈉1.5mL,使溶解,再加入蒸餾水8.5mL即成。
制法:將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中,加熱煮沸,候冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中,加熱煮沸,候冷,以無菌操作與上液混合。再加入1% L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液1mL。
分裝于滅菌瓶中.每瓶100mL,pH應為7.0±0.1。
十七、亞硫酸鉍瓊脂(BS)
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
葡萄糖 5g
硫酸亞鐵 0.3g
磷酸氫二鈉 4g
煌綠 0.025g
檸檬酸鉍銨 2g
亞硫酸鈉 6g
瓊脂 18~20g
蒸餾水 1000mL
pH 7.5
制法:
1.將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。
2將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。
3將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解,冷至80℃。
4將以上三液合并,補充蒸餾水至1000mL,校正pH,加0.5%煌綠水溶液5mL,搖勻,冷至50~55℃,傾注平皿。
注:此培養基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱,以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備,貯存于室溫暗處,超過48h不宜使用。
十八、三糖鐵瓊脂(TSI)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵銨 0.2g
硫代硫酸鈉 0.2g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000 mL
pH 7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH,加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL,搖勻,分裝試管。裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min,放置高層斜面備用。
十九、三糖鐵瓊脂換用方法
成分:
蛋白胨15g
眎胨5g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵 0.2g
硫代硫酸鈉 0.3g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000 mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH,加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5 mL,搖勻,分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min,放置高層斜面備用。
二十、嗜鹽性試驗培養基
成分:
蛋白胨2g
氯化鈉 按不同量加
蒸餾水100 mL
pH7.7
制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。待溶解后分裝試管,121℃高壓滅菌15min。