核酸的分離方法
核酸（nucleic?acid）是遺傳信息的攜帶者,是基因表達的物質基礎.無論是進行核酸結構還是功能研究,首先需要對核酸進行分離和純化.核酸樣品質量將直接關系到實驗的成敗.核酸分離、純化原則：1.保持核酸分子一級結構的完整性.因為遺傳信息全部儲存在一級結構之中,核酸的—級結構還決定其高級結構的形式以及和其他生物大分子結合的方式.2.分離核酸原則:1）溫度不要過高；2）控制pH值范圍(pH值5-9); 3）保持一定離子強度; 4）減少物理因素對核酸的機械剪切力.
在核酸分離提取中最重要的是要防止核酸的生物降解,細胞內或外來的各種核酸酶能消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵,破壞核酸一級結構.所用器械和一些試劑需高溫滅菌,提取緩沖液中需加核酸酶抑制劑.
常用的DNA酶抑制劑有1.金屬離子螯合劑：如EDTA-Na2(乙二胺四乙酸二鈉)、8-羥基喹啉.2.陰離于型表面活性劑如SDS,該試劑除對核酸酶有抑制作用外,還能使蛋白質變性,并與變性蛋白結合成帶負電荷的復合物,該復合物在高鹽溶液中沉淀.
常用的RNA酶（RNAase)抑制劑有：1.皂土（bentonite ）作用機制：皂土帶負電荷,能吸附RNase,使其失活.2. DEPC(二乙基焦碳酸鹽) (C2H5OCOOCOOC2H5)粘性液體,很強的核酸酶抑制劑.作用機制：與蛋白質中His結合使蛋白變性.
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