放射免疫測定胰島素實驗材料和操作方法
一、材料及試劑
1、胰島素標準品(不同濃度的)
2、125 I-胰島素
3、抗血清
4、第二抗體
5、分析試劑 為0.05 Mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。
6、計數儀
7、試管、加樣器、離心機等
二、操作方法
1、按表進行。
2、測定和計算反應完畢后,將各管于室溫3 000 r/ min離心30min,仔細吸取上清液,收集于放射性廢液貯存容器內。用-計數儀分別測量各管沉淀物(B)的放射性強度(cpm),以兩管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值為Bo,分別計算結合率(B%,即B/Bo×100%),用B%為縱坐標,不同濃度胰島素標準品為橫坐標,繪制標準曲線。然后根據待檢管的B%,從標準曲線中即可查得胰島素的相應含量
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