藥物檢測案例--吩噻嗪類藥物及其制劑的質量檢測

一、性狀

鹽酸氯丙嗪、鹽酸異丙嗪和奮乃靜的性狀描述見表1。

二、鑒別

(一)化學法

?1.氧化劑顯色反應吩噻嗪類藥物的硫氮雜蒽母核中的硫為二價,易被不同氧化劑氧化為砜或亞砜類物質而顯色。常用的氧化劑為硫酸、硝酸、過氧化氫,氧化呈色反應見表2。

2.與鈀離子配合顯色? 吩噻嗪類藥物的硫氮雜蒽母核中的硫與鈀離子形成有色的配位化合物(紅色),其氧化產物砜和亞砜無此反應,專屬性強。

(二)光譜法

1.紫外一可見分光光度法? 本類藥物中的硫氮雜蒽母核為共軛三環的π系統,在紫外一可見光區有吸收,如鹽酸氯丙嗪的鹽酸溶液在254nm和306nm有最大吸收,奮乃靜的甲醇溶液在258nm與313nm處有最大吸收,可用于藥物的鑒別。

2.紅外分光光度法原料藥鹽酸氯丙嗪、鹽酸異丙嗪和奮乃靜,均可采用紅外分光光度法進行鑒別,要求供試品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜一致。

三、檢查

?(一)特殊雜質檢查

?吩噻嗪類藥物在合成過程中由于副反應,以及在貯藏過程中由于結構中的硫易被氧化且遇光分解,均會產生特殊雜質。如鹽酸異丙嗪中的特殊雜質主要為合成時產生的少量異構體雜質[N,N-二甲基-2-(10H-吩噻嗪-10-基)丙-1-胺]和貯藏過程中產生的降解產物。藥典將這些雜質規定為有關物質的檢查,采用高效液相色譜法控制其限量。

鹽酸異丙嗪中有關物質的檢查方法:避光操作。取本品,加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液,作為供試品溶液;精密量取1ml,置100ml量瓶中,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻作為對照溶液。照高效液相色譜法試驗,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以水(用冰醋酸調節pH至2.3)-甲醇(55:45)為流動相,檢測波長為254nm。理論塔板數按鹽酸異丙嗪峰計算不低于3000,鹽酸異丙嗪峰與相對保留時間1.1～1.2的雜質峰的分離度應大于2.0。取對照溶液20μl注入液相色譜儀,調節檢測靈敏度,使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%,再精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的3倍。供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0%)。

鹽酸異丙嗪的硫氮雜蒽母核中的硫為二價,易被氧化,遇光不穩定,故其有關物質檢查應避光操作,溶液也應臨用前配制。雜質限量的計算如下:

式中,L為雜質限量;C_對為對照品溶液濃度;V_對為對照品溶液體積;C_供為供試品溶液濃度;V_供為供試品溶液體積。

(二)制劑檢查

?1.溶出度測定藥典規定鹽酸氯丙嗪片、酸異丙嗪片和奮乃靜片均需檢查溶出度。其中,鹽酸氯丙嗪片采用紫外-可見分光光度法中的百分吸收系數法測定與計算其溶出量。

鹽酸氯丙嗪片的溶出度測定方法:避光操作。取本品,照溶出度測定法(第一法),以水1000ml為溶出介質,轉速為每分鐘100轉,依法操作,經30分鐘時,取溶液10ml濾過,精密量取續濾液適量,用鹽酸溶液(9→1000)定量稀釋制成每1ml中含鹽酸氯丙嗪5μg的溶液,搖勻,照紫外一可見分光光度法,在254nm的波長處測定吸光度,按C₁₇H₁₉CIN₂S·HCl的吸收系數為915計算每片的溶出量。限度為標示量的70%,應符合規定。

2.含量均勻度測定在生產過程中,某些小劑量的劑型由于生產工藝或設備的原因,可引起含量不均勻。測定含量均勻度的目的在于控制每片(個)含量的均一性,以保證用藥劑量的準確。藥典規定了奮乃靜片測定含量均勻度。

奮乃靜片含量均勻度測定方法:避光操作。取本品1片,除去包衣后,置乳缽中,加水5滴,濕潤后,研細,加溶劑(取乙醇500ml,加鹽酸10ml,加水至1000ml,搖勻)適量,研磨均勻,用溶劑定量轉移至50ml(2mg規格)或100ml(4mg規格)量瓶中,充分振搖使奮乃靜溶解,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液1ml,置10ml量瓶中,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液;另取奮乃靜對照品,精密稱定,用上述溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含4μg的溶液,作為對照品溶液。取上述兩種溶液,照紫外-可見分光光度法,在255nm的波長處分別測定吸光度,計算含量,應符合規定。

含量均勻度檢查需計算每片(個)以標示量為100的相對含量,故每片的含量按式計算:

式中,A_s為供試品溶液的吸光度;A_r為對照品的吸光度;D_s為供試品溶液的稀釋倍數;D_r對照品溶液的稀釋倍數;V_s為供試品溶液的定容體積;Vr為對照品溶液的定容體積;m,為對照品的稱樣量。

四、含量測定

?吩噻嗪類藥物的含量測定方法有非水溶液滴定法、外-可見分光光度法氧化還原滴定法、電化學法及色譜法等。下面僅介紹前兩種方法。

(一)非水溶液滴定法

吩噻嗪類藥物母核上10位側鏈上的氮原子具有一定的堿性,可用非水溶液滴定法測定含量,即在非水介質中用高氯酸滴定。

鹽酸氯丙嗪的含量測定方法:取本品約0.2g,精密稱定,加冰醋酸10ml與醋酐溶解后,照電位滴定法,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于35.53mg的C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl。按干燥品計算含C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl不得少于99.0%。

鹽酸氯丙嗪的含量按式計算:

?式中,m_s為供試品的稱取量(g);V為供試品消耗滴定液體積(ml);V₀為空白試驗消耗滴定液體積(ml);T為滴定度(mg/ml);F為滴定液的校正因子。

(二)紫外可見分光光度法

?吩噻嗪類藥物在紫外區有吸收,可用紫外-可見分光光度法測定原料及其制劑的含量。如,鹽酸氯丙嗪鹽酸溶液在254nm的波長處有最大吸收,在306nm的波長處有次最大吸收,但其原料及其制劑的含量測定均選用254nm的波長。奮乃靜溶液在255nm的波長處有最大吸收。通過測定最大吸收波長處的吸光度,再結合吸收系數法或者對照品比較法,可以測得其含量。

1.鹽酸氯丙嗪片的含量測定方法 ? 避光操作。取本品10片,除去包衣后,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于鹽酸氯丙嗪10mg)置100ml量瓶中,加鹽酸溶液(9→1000)70ml,振搖使鹽酸氯丙嗪溶解,用同一溶劑稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液5ml,置100ml量瓶中,加同一溶劑稀釋至刻度,搖勻照紫外-可見分光光度法在254nm的波長處測定吸光度,按C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl的吸收系數為915計算,即得。本品含鹽酸氯丙嗪(C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl)應為標示量的93.0%～107.0%。

2.奮乃靜片的含量測定方法避光操作。取本品20片,除去包衣后,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于奮乃靜10mg),置100ml量瓶中,加溶劑(取乙醇500ml,加鹽酸10ml,加水至1000ml,搖勻)約70ml,充分振搖使奮乃靜溶解,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液5ml,置100ml量瓶中,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液;另取奮乃靜對照品,精密稱定,用溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液,作為對照品溶液。取上述兩種溶液,照紫外-可見分光光度法,在255nm的波長處分別測定吸光度,計算,即得。本品含奮乃靜(C₂₁H₂₆ClN₃OS)應為標示量的93.0%～107.0%。

3.鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定方法避光操作。精密量取本品適量(約相當于鹽酸氯丙嗪50mg),置200ml量瓶中,用鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻;精密量取2ml,置100ml量瓶中,用鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻,照紫外-可見分光光度法,在254nm的波長處測定吸光度,按C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl的吸收系數為915計算,即得。本品含鹽酸氯丙嗪(C₁₇H₁₉ClN₂S·HCl)應為標示量的95.0%～105.0%。

?五、其他噻嗪類藥物的質量檢測

?除上述介紹的藥物外,《中國藥典》還收載了其他吩噻嗪類藥物,其檢測項目與方法各異。