原生質體融合的原理是什么?
原生質體融合即植物體細胞雜交,是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有在脫去細胞壁成為原生質體后才能融合,所以植物的細胞融合也稱為原生質體融合。
根據融合時細胞的完整程度,原生質體融合可分為兩大類:對稱融合(symmetric fusion)-即兩個完整的細胞原生質體融合;非對稱融合(asymmetric fusion)-利用物理或化學方法使某親本的核或細胞質失活后再進行融合,它可以分為幾種:
用于細胞核或細胞質失活的方法分為物理和化學兩大類:
1、物理方法常采用射線處理,如X射線、射線等,它們能使細胞核失活;還有離心,振動,電激等。
2、化學處理目前常用的試劑有聚乙二醇(PEG)誘導融合,核失活-碘乙酰胺(IOA)、碘乙酸(Iodoacetate);質失活-羅丹明(R-6-G,它是一種親脂染料,能夠抑制線粒體的氧化磷酸化過程而達到失活作用。
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