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    反向PCR引物設計需要同源臂嗎

    2022.7.15

    需要。
    用pcr擴的時候就把同源重組片段引入,vector酶切后5端選15nt,3'端選15nt分別加到正向引物和反向引物上,就做成了同源臂。同源序列是指在同一物種不同個體間或不同物種間相同或相似的DNA序列,而同源臂是指一段同源序列,類似于trna氨基酸臂的結構,所謂臂,指的是手臂樣結構。
    引物是人工合成的兩個寡核苷酸序列:一個引物與靶區域端的一條dna模板鏈互補,另一個引物與靶區域另一端的另條dna模板鏈互補,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3端開始合成新的核酸鏈。

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