流式圖四個象限怎么看凋亡
流式圖四個象限看凋亡:在二維散點圖上,PI 和 annexin V 分別是X和Y軸。一般認為PI單染的細胞是已經死亡的細胞,annexin V 單染的細胞是凋亡早期的細胞,而雙染是凋亡中期的。
需要在散點圖上先畫出4個象限,位置根據無染色的陰性細胞先定出左下象限。Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑,在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。
相關分析
使用流式細胞儀正確分析Annexin V-FITC/PI雙染的細胞前要求儀器的熒光補償來去除兩種染料激發光之間的疊加。因為熒光補償設置與PMT的電壓直接相關,所以不同儀器之間的補償不同。建議在實驗開始階段分析經Annexin V、PI分別單染的細胞來調整熒光補償去除光譜重疊。根據未處理細胞空白對照和經Annexin V、PI分別細胞染色后的單染對照的分析設定十字門的位置。
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