至今，還沒有一種固定化方法可以普遍地適用于每一種酶，特定的酶要根據具體的應用目的選擇特定的固定化方法。已建立的固定化方法，大致可分為三類：載體結合法（包括物理吸附。離子結合法、鰲合法。共價結合法），交聯法和包埋法（包括聚合物包埋法、疏水相互作用、微膠囊、脂質體包埋）。

載體結合法：

（1）物理吸附法: 是制備固定化酶最早采用的方法，它足以同體表面物理吸附為依據，使酶一水不溶性載體相接觸而達到酶吸附的目的。 （2）鰲合法 :這是一種比較吸引人的技術，它主要是利用螫合作用將酶直接贅合到表面含過渡金屬化合物的載體上，具有較高的操作穩定性。 （3）共價結合法: 共價結合法是通過酶分子上的功能團，與載體表面上的反應基團發生化學反應形成共價鍵的一種固定化方法，是研究得最多的固定化方法之一。

共價交聯法: 共價交聯法是通過雙功能或多功能試劑，在酶分子間或酶分一產和載體間形成共價鍵的連接方法。這些具有兩種相同或不同功能基團的試劑叫做交聯劑。常見的交聯劑有順丁烯二酸配和乙烯共聚物、戊二醛等，其中以戊二醛最為常用。

包埋法: 將酶包埋在高聚物凝膠網格中或高分于半透膜內的固定方法；前者又稱為凝膠包埋法，后者則稱為微囊法。包埋法一般不需要與酶蛋白的氨基酸殘基起結合反應，較少改變酶的高級結構，酶的回收率較高；但它僅適用于小分于底物和產物的酶，因為只有小分子物質才能擴散進人高分子凝膠的網格，并且這種擴散阻力還會導致固定化酶動力學行為的改變和活力的降低。微囊法是利用各類型的膜將酶封閉起來，這類膜能使低分子產物和底物通過，而酶和其他高分于物質不能通過。纖維包埋法是將酶包埋在合成纖維的微孔穴中的方法，其優點是成本低、可用于酶結合的表面積大。有優良的抗微生物和抗化學試劑的性能，最常用的聚合物是醋酸纖維素。 ?