脂類染色法

脂肪和類脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）統稱為脂類。它是構成人體組織的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學組成上，脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關的物質。脂類的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存積于脂肪組織中，并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內。

在病理檢驗中，脂類染色法最常用以證明脂肪變性，脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料，最常用的有蘇丹Ⅲ，蘇丹Ⅳ，蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色，實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現染料的顏色。經研究認為組織中脂質在液態或半液態時，對蘇丹染料著色效果最好。根據這一原理，適當提高溫度（37℃-60℃）對組織切片染色效果是有好處的。

脂類染色，用冰凍或石蠟切片，以水溶性封固劑封固，如甘油明膠和阿拉伯糖膠等。

一、蘇丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）染色法：

操作方法：

（1） 固定于10%甲醛的組織。

（2） 水洗后采用冰凍或石蠟切片。

（3） 經蒸餾水后，浸染于Harris蘇木素 或明礬蘇木素中淡染1-2分鐘。

（4） 自來水沖洗。

（5） 水洗后，移入70%酒精5秒鐘。

（6） 投入蘇丹Ⅲ染液中約30分鐘或更長時間，置于56℃溫箱中。

（7） 在70%酒精中洗滌5-10秒鐘。

（8） 洗于蒸餾水中，然后將切片移于載玻片上。

（9） 切片移于玻片上，將切片周圍的水分小心擦掉。

（10） 甘油明膠封固。

結果：脂肪呈橙紅色或鮮紅色或黑色，膽脂素呈淡紅色，脂肪酸不著色，細胞核呈藍色。

試劑配制：

1、蘇丹Ⅲ染液配法：將0.15克蘇丹Ⅲ溶解于100ml70%酒精或純丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），臨用時過濾，所得濾液即為飽和濃度。

注：浸染時，容器必須蓋好，否則酒精或丙酮揮發，染料沉淀。

2、甘油明膠配制：

明膠 40g

蒸餾水 210ml

甘油 250ml

石碳酸結晶 5ml

先將明膠浸入蒸餾水中2小時或更長時間，然后加甘油和石碳酸，加熱15分鐘，搖攪直至混合液均勻為止。