豬干擾素- γ （ IFN- γ ） 酶聯免疫 分析（ ELISA ）

試劑 盒使用說明書

本試劑僅供研究使用 ?? ????? 目的：本試劑盒用于測定豬血清，血漿及相關液體樣本中 干擾素 - γ （ IFN- γ ） 含量。

實驗原理 ：

?? 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定 標本 中 豬干擾素- γ （ IFN- γ ） 水平。用純化的 豬干擾素- γ （ IFN- γ ） 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入 干擾素- γ （ IFN- γ ） ，再與HRP 標記的羊抗豬抗體結合，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物 ，經過徹底洗滌后 加 底物TMB 顯色。 TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 豬干擾素- γ （ IFN- γ ） 呈正相關。用酶標儀在 450 nm波長下測定吸光度（ OD 值）， 通過標準曲線 計算樣品 中 豬干擾素- γ （ IFN- γ ） 濃度。

試劑盒組成 ：

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樣本處理及要求 ：

1.?血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2.?血漿：應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3.?尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4.?細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5.?組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的