熒光素

熒光是指一個分子或原子吸收了給予的能量后即刻引起發光，停止能量供給，發光也瞬時停止（一般持續10-7～10-8s）。可以產生明亮熒光的染料物質，稱熒光色素。目前主要常用的熒光色素有以下3種： （一）異硫氰酸熒光素（Fluorescein isothiocyanate, GITC） 呈黃色、橙黃或褐黃色粉末或結晶，性質穩定，在室溫下能保存2年以上，在低溫中可保存多年。易溶于水和酒精。最大吸收光譜為490～495nm，最大發射光譜為520～530nm，呈現黃綠色熒光，分子量為398.4（圖3-5）。 在堿性條件下，FITC的異硫氰酸基在水溶液中與 免疫球蛋白 的自由氨基經碳酰胺化而形成硫碳氨基鍵，成為標記熒光 免疫球蛋白 ，即熒光 抗體 。反應式如下（圖3-6）： 一個Ig分子上最多能 標記15～20個FITC分子。 圖3-5　FITC的吸收光譜和發射光譜 ? 圖3-6　 抗體 的FITC標記反應式