ELISA夾心法和競爭法在Excel中擬和曲線
一、雙抗夾心法擬和曲線
打開EXCEL軟件;在工作表中輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數據,用插入里的圖表按鈕,進入圖表向導,在“標準類型”中選擇“xy散點圖”;在“子圖表類型”中選擇“折線散點圖”,按“下一步”;選擇“系列產生在行”,按“下一步”;數據標志,可以填寫:如數據y軸,OD值;數據x軸,濃度;按下一步,點擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢線”,在類型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法,在公司已經提供的圖表上, 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數據中,就可以擬和新的曲線。
二、計算濃度
舉例
第一次實驗:
標準曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1
R2 = 0.9745 為例,已知OD值,計算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +(y-0.1)=0
ax2 +bx +C=0
a=4E-05;b= -0.026; C= y-0.1
x=(-b-(b*b-4a(y-0.1))(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*(y-0.1))(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*(y-0.1))/2))/(2*0.00004)
通用公式為: Y=ax2 +bx +C
x=(-b-EXP(LN(b*b-4a(y-c))/2))/(2*a)
您可以應用excel的公式拷貝功能,計算所有濃度。
簡化方法 如果有示例的excel表格,過程可參照附件的EXCEL表格,您的新數據可以這樣擬和:雙擊圖表,把它輸入到圖表的數據中,就可以擬和曲線。
根據曲線方程序,更改公式的參數,計算出濃度。
三、競爭法擬和曲線
Logit-log 直線回歸
競爭法一般情況下用Logit-log 直線回歸的方法可以擬和成近似一條直線;
令 p = OD/OD0, q = 1 - p,
y = ln (p / q), x = lg (濃度),
其中: OD 為反應值,
OD0 為濃度為 0 的反應值的均值,
則方程為:
y = a + b*x