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SP(streptavidin-perosidase)法，即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。

按標記物質的種類，如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等，可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標法和免疫金銀法等。按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法);按結合方式可分為抗原 -抗體結合，如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法和親和連接，如卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(SP)法等，其中SP法是最常使用的方法。

一般的sp法步驟啊，具體如下：

1、烤片，68℃，20分鐘，

2、常規二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水;二甲苯I20min?二甲苯II20min?100%酒精10min?100%酒精10min?95%酒精5min?80%酒精5min?70%酒精5min

3、阻斷滅活內源性過氧化物酶：3%H2O237℃孵育10min，PBS 沖洗3X5min;

4、抗原 修復：置0.01M枸櫞酸緩沖液(PH6.0)中用煮沸(95℃，15-20min)，自然冷卻20min以上，再用冷水沖洗缸子，加快冷卻至室溫，PBS沖洗3X5min。

5、正常羊血清工作液封閉，37℃10min，傾去勿洗。

6、滴加一抗4℃冰箱孵育過夜，PBS 沖洗3X5min(用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照);

滴加生物素標記二抗，37℃孵育30min，PBS 沖洗3X5min;

7、滴加辣根過氧化物酶標記的鏈霉素卵白素工作液，37℃孵育30min，PBS沖洗3X5min;

8、DAB/H2O2反應染色，自來水充分沖洗后，

蘇木素復染，常規脫水，透明，干燥，封片。