【實驗目的】

1. 在小白鼠身上復制乏氧性缺氧和血液性缺氧，并了解缺氧的分類。

2. 觀察比較各型缺氧過程對機體呼吸、循環及全身狀態的影響。

3. 了解不同年齡、種屬對缺氧耐受性的影響。

4. 了解機體不同代謝和神經活動狀態對缺氧耐受性的影響。

5. 了解影響缺氧過程的因素及其在防治缺氧中的意義。

【實驗對象】

成年小白鼠、幼年小白鼠（生后3～5天）、青蛙（或蟾蜍）。

【實驗試劑與器材】

1. 器材　缺氧瓶（100 ml帶塞錐形瓶）8個、一氧化碳發生裝置、手術剪、鑷子各一只、1ml和5ml注射器各一只，2 ml刻度吸管一只、抽氣機、干燥器、橡皮管、彈簧夾、凡士林、250ml燒杯兩個、溫度計、普通天平及砝碼。

2. 藥品　2.5％亞硝酸鈉、0.5％美蘭溶液、甲酸、濃硫酸、鈉石灰。生理鹽水、冰水、溫水（40℃～45℃）。1%咖啡因，20%烏拉坦，鼠板。

【實驗方法與步驟】

1. 乏氧性缺氧

（1）取小白鼠一只，稱重，將其置入含5g鈉石灰的缺氧瓶內。觀察呼吸（頻率、深度及節律），循環系統狀態（耳血管直徑大小、數目多少及耳、鼻唇部和尾部的顏色）以及全身狀態情況（動物活潑程度、動作是否靈活協調等）。

（2）取橡皮塞密閉瓶口（橡皮塞周圍可涂一層凡士林或水以防止漏氣），記錄密閉起始時間。觀察動物呼吸、循環系統狀態以及全身狀態的變化，直至動物死亡，記錄存活時間。

（3）動物尸體解剖，待2、3實驗做完后，再依次打開腹腔，比較血液和臟器的顏色。

（4）根據實驗條件可自行設計條件因素（溫度變化、不同體重、減壓及機體耗氧狀態等）對耗氧耐受性影響的實驗。

2. 一氧化碳中毒性缺氧

（1）取小白鼠一只，觀察同1之（1），尾部取血一滴置裝有2m1生理鹽水的小試管內備用。

（2）用帶有通氣管的塞子密閉瓶口，從通氣管中用空針將瓶內空氣抽出5m1，并立即注入一氧化碳氣體5ml，夾閉通氣管，記錄時間，注意觀察小白鼠呼吸、循環系統狀態以及全身狀態有何變化。

（３）待小白鼠呼吸明顯加深、變慢或出現痙攣倒下時，立即打開缺氧瓶塞，迅速取出小白鼠，再次從尾部取血一滴，置入2ml生理鹽水小試管，與第一次取血顏色對比。

（４）動物死亡后，剖開腹腔，觀察內臟顏色，并與實驗1的結果相比較。

3. 亞硝酸鹽中毒性缺氧

（1）取體重相近的兩只小白鼠，向腹腔內注入2.5％亞硝酸鈉（NaNO2）0.3ml，其中一只注藥后立即再向腹腔注入0.5％美蘭溶液0.3ml，進行搶救；另一只注藥后向腹腔注入生理鹽水0.3ml作對照。

（2）觀察同1之（1），比較兩鼠癥狀出現情況及死亡時間。

（3）尸體處理同2之（3）。

4. 年齡、種屬不同對缺氧耐受性的影響

（1）取初生鼠、成年鼠及青蛙（或蟾蜍）各一只一并放入干燥器內。緊閉干燥器蓋并在蓋沿涂上凡士林或水防止漏氣。

（2）模擬高空空氣稀薄情況，抽吸干燥器內空氣，直至動物死亡為止。觀察初生鼠和青蛙是否死亡。比較死亡發生時間的早晚。

5. 機體代謝和神經活動狀態不同對缺氧耐受性的影響

（1）選體重相近（最好相差不超過1g）的小白鼠兩只。

（2）取其中一只皮下注射1%咖啡因（0.05ml/10g體重）后，放入內裝鈉石灰的缺氧瓶內。10min后，密閉瓶口，勿使漏氣，記錄時間，觀察動物的表現和存活時間。

（3）取另一只小白鼠，腹腔注射20%烏拉坦（0.06ml/20g體重）；10min后，密閉瓶口，記錄時間，并與注射咖啡因的小白鼠結果做比較。

6. 外界環境溫度不同對缺氧耐受性的影響

取體重相近小白鼠2只，分別裝入口徑大小一致的裝有鈉石灰的缺氧瓶內，密閉瓶口，分別將缺氧瓶置入盛有40℃～45℃溫水、冰水（0℃～4℃）的2個大燒杯內，觀察2只小白鼠出現缺氧癥狀和存活時間。

【注意事項】

（1）缺氧瓶一定要密閉（可用凡士林或水涂在瓶塞周圍）。

（2）小白鼠腹腔注射應稍靠在下腹，勿損傷肝臟，應避免將藥液注入膀胱和腸腔。

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附一：一氧化碳的制備

置2ml甲酸于試管中，后加入1ml濃硫酸，立即用塞將試管塞緊，加入濃硫酸即產生一氧化碳。

若CO產生不足，可用酒精燈加熱（注意安全），注意控制CO產生速度不宜太快。

　思 考 題

1. 什么是缺氧? 分幾種類型? 分類依據是什么?

2. Hypotonic hypoxia，hemic hypoxia，Circulatory hypoxia，histotoxic hypoxia分別由哪些原因引起，其血氧變化特點分別是什么?

3. 乏氧性缺氧與其他類型缺氧引起呼吸的變化有無不同? 為什么?

4. 缺氧時冠脈、肺血管有何變化?其機制是什么?

5. 缺氧時2·3-DPG為何增加?

6. 缺氧時血中Hb和RBC增加有何意義? 機制是什么?

7. 為何中樞神經系統對缺氧最敏感？

8. 影響機體缺氧耐受性的因素有哪些? 為什么?

9. 什么是氧中毒? 發生機制是什么?

10. 氧自由基和缺氧、缺血有何關系? 缺氧、缺血是否可導致氧自由基的增加?

11. 各型缺氧對呼吸有何影響? 血液及肝臟顏色有何不同? 為什么?

12. 環境溫度及機體耗氧狀態不同對缺氧耐受性有何影響? 為什么?

13. 各種缺氧小白鼠的表現有何異同? 為什么?

14. 種屬、年齡差異對缺氧耐受性有什么影響?

15. 臨床許多治療措施如低溫麻醉，低溫下體外循環，低溫控制高熱抽搐，亞冬眠療法等，其理論依據與本實驗哪些環節有關系，為什么? 請說明其機制。

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