蛔蟲及寄生蠕蟲卵的檢查

　　一、目的

　　了解蛔蟲的形態結構以及線形動物（假體腔動物）的一般特征；學習幾種常見寄生蠕蟲卵的檢查方法。

　　二、內容

　　（一）觀察蛔蟲浸制標本的外部形態。

　　（二）解剖并觀察蛔蟲內部結構。

　　（三）顯微鏡下觀察蛔蟲橫切玻片標本。

　　（四）寄生蠕蟲卵的檢查。

　　（五）線形動物重要代表示范。

　　三、實驗材料和用具

　　人蛔蟲或豬蛔蟲、馬蛔蟲浸制及橫切面玻片標本。事先準備的學生自己糞便樣品。

　　放大鏡、解剖鏡、顯微鏡、蠟盤、尖頭鑷、解剖剪、解剖針、大頭針、三角量杯（或稱錐形量杯）、長吸管、篩子、玻璃漏斗、玻璃棒、載玻片、蓋玻片、離心機、離心管、錐形瓶、燒杯、竹簽、火柴棒或牙簽、4％煤酚皂、試管及試管架等。

　　生理鹽水、飽和鹽水（37．5g Nacl或食鹽，加熱水100mL）或33％硫酸鋅。

　　四、實驗操作及觀察

　　檢查蠕蟲卵時，盛糞便的容器應潔凈，糞便要新鮮且量不宜太少；鑒別蟲卵時，要與氣泡、脂肪滴、孢子等雜物區別開來。

　　（一）蛔蟲：

　　1．外形：前端圓，后端尖。雄蟲后端向腹面彎曲，有兩根交接刺，常由泄殖腔孔中伸出。雌蟲較粗大，后端不彎曲，肛門開口于腹面近體末端；生殖孔開口于體前端腹面約1/3處。體表角質膜上有很多細橫紋，前端中央有口，口的背側有1個背唇，腹側有2個腹唇，背唇上有2個、腹唇上各有1個乳突。腹面前端，離腹唇2mm處有1個排泄孔。

　　2．內部解剖：取雌、雄蟲置蠟盤中，從身體背部略偏背中線處剪開。用鑷子拉開兩側的體壁，以大頭針將蛔蟲釘在蠟盤上，略加水，便于觀察。

　　（1）體線：背、腹面的正中分別有1條背線和腹線，兩側各有1條側線。

　　（2）消化系統：由口、咽、腸、直腸及肛門組成的長扁形消化管。

　　（3）排泄系統：排泄管2條，分別位于側線中。

　　（4）生殖系統：雌雄異體。

　　雄性：體中部近前端有一細長、彎曲的管狀精巢，由較短的輸精管與較粗大的管狀儲精囊相通。儲精囊連接細直的射精管，其末端雄孔開口于泄殖腔中。

　　雌性：體中部近后端有2條細長、彎曲的管狀卵巢，各通入輸卵管，再通入較粗大的子宮。2條子宮匯合成管狀的陰道，末端的生殖孔開口于腹面前端約1/3處。

　　3．橫切面玻片標本的觀察：

　　（1）角質膜：身體表面一層非細胞構造的膜。

　　（2）表皮層：位于角質膜內側，細胞界限不分明，僅可見顆粒狀的細胞核及縱行纖維。

　　（3）體線：4條，縱行，由表皮層向內增厚形成。

　　背線及腹線：細，在身體背面及腹面的正中，二者形狀完全相同。背、腹線的內側膨大呈圓形，內含背神經及腹神經。腹神經比背神經粗，可以此區分背、腹線。

　　側線：位于體兩側。其內側有一圓孔，即排泄管。

　　（4）肌肉層：較厚，被4條體線分隔成4個部分，每個部分由許多縱肌細胞組成。每個縱肌細胞分成以下兩部分：

　　收縮部：位于基部，含橫行細纖維，富有彈性，能收縮。

　　原生質部：位于端部，含原生質和細胞核。

　　（5）腸：為體腔中央一扁圓形的管道，由單層柱狀上皮細胞組成。腸中間的空隙為腸腔。

　　（6）初生體腔：腸與體壁之間的空腔。

　　（7）卵巢、輸卵管和子宮：在體腔中可見形似車輪的卵巢，中心稱軸，周圍有輻射狀排列的卵原細胞。輸卵管較粗，圓形，軸已消失。子宮更粗，圓形，有明顯的空腔，內含卵。

　　（8）精巢、輸精管和儲精囊：在體腔中可見形似車輪的精巢，中心稱軸，周圍有輻射狀排列的精原細胞。輸精管較粗，圓形，含顆粒狀精細胞，軸已消失。儲精囊更粗，圓形，有明顯的空腔，含條形精子。

　　（二）寄生蠕蟲卵的檢查：

　　1．常用檢查方法：

　　（1）涂片法：在清潔的載玻片中央滴一滴生理鹽水，用竹簽或火柴棒挑取少量糞便（約芝麻大），置于載玻片上的生理鹽水中，均勻涂布。加蓋玻片后在低倍鏡下檢查，再換高倍鏡證實。

　　（2）浮集法：利用蟲卵比重小于飽和鹽水而浮于液面上的原理，收集漂浮的液膜進行檢查（此法不適于有蓋的蟲卵及未受精的蛔蟲卵）。以竹簽挑取蠶豆大的糞便一塊（約重1g）置于試管中，先加少量飽和鹽水（或33％硫酸鋅溶液），用玻璃棒將糞便調勻，再邊加飽和鹽水邊攪勻。

除去上浮的粗糞渣，加飽和鹽水直至稍高出試管口而不外溢為止。立即在試管口上覆一干凈的載玻片或蓋玻片。在試管架上靜置15～20min后，將載玻片或蓋玻片取下，加上蓋玻片或將蓋玻片放在載玻片上，置顯微鏡下檢查。

　　（3）離心沉淀濃集法：利用蟲卵比重大于水的原理，通過離心沉淀使蟲卵迅速沉集管底，吸取管底沉渣檢查。以竹簽取蠶豆大的糞便一塊，置燒杯中加少量水調勻。經篩子、漏斗裝入離心管中，加上清水后離心（1500r/min）3min。取出離心管，傾去上層液，再加水調勻，離心沉淀，反復幾次直至上層液澄清為止。最后傾去上層液，吸取沉渣鏡檢。

　　（4）孵化法：先作離心沉淀，將沉渣倒入1000mL的錐形瓶中，加清水至瓶口，置于20～28℃的恒溫箱中。箱內有照明設備，以利蟲卵孵化。經12h后，開始觀察；72h后取出，觀察孵化效果。此法適用于血吸蟲卵內的毛蚴孵化，不適用于鉤蟲卵內的鉤蚴孵化。

　　2．常見寄生蟲卵的鑒別：

　　（1）蛔蟲卵：分受精卵與未受精卵2種，兩者在形態上不同。

　　受精卵：短橢圓形，殼厚，外有一層凹凸不平的蛋白膜（有時脫落）；內含一個圓形的卵細胞，細胞兩端與殼之間的空隙呈新月形。

　　未受精卵：較不規則，比受精卵狹長；殼與蛋白膜（有時脫落）較薄；內含反光性較強的卵黃顆粒，呈油滴狀。

　　（2）蟯蟲卵：無色透明，芒果形，一側扁平，一側隆起，殼厚，內含一幼蟲。

　　（3）鉤蟲卵：橢圓形，無色透明，殼薄，兩端鈍圓。一般在新鮮糞便中蟲卵含4～8個卵細胞。卵細胞和卵殼之間有較大而清楚的空隙。

　　（4）血吸蟲卵：淡黃色，橢圓形，卵殼較薄，無蓋，一側有小刺，小刺常因蟲卵位置不同或卵殼上附著污物而不易看見。成熟卵內含有1個毛蚴。

　　（5）華枝睪吸蟲卵：為常見寄生蠕蟲卵中最小的。黃褐色，形如芝麻或燈泡狀，前端稍窄，有一小蓋及肩峰，后端鈍圓，有一逗點狀突起。卵內含一毛蚴。

　　（6）豬絳蟲卵：黃褐色，圓形。胚膜厚，具輻射狀條紋，內含1個六鉤蚴。在糞便中查見的蟲卵，其卵殼多已脫落。

　　五、示范

　　（一）蟯蟲（Enterobius vermicularis）：寄生于人的盲腸、闌尾、結腸與小腸附近。蟲體白色，細線頭狀，雌蟲較長，后端細尖；雄蟲較短，尾部卷曲。妊娠雌蟲多于夜間移行于肛門和會陰附近皮膚上產卵。

　　（二）十二指腸鉤蟲（Ancylostoma duodenale）：寄生于人的小腸內。蟲體頭部有一相當深的口囊，口囊腹面兩側有鉤齒2對。雌蟲較大，生殖孔在身體的后半部；雄蟲較小，尾端有一盤形的交合傘。

　　（三）鐵線蟲（Gordius aquaticus）：成蟲自由生活于土壤或淡水溝渠中，長可達1m。雄蟲尾端叉狀；雌蟲尾部尖錐狀。卵產于水中，幼蟲寄生于節肢動物的血腔內，將成熟時離開寄主，回到水中生活。

　　（四）豬巨吻棘蟲（Macracan thorhynchus hirudinaceus）：常寄生于豬腸內。蟲體乳白色或淡紅色，呈長圓筒形，表面有橫行的細皺紋。前端有一可伸縮的吻，上具5～6列倒鉤。雄蟲較小，尾部有鐘狀的交合傘；雌蟲較大，尾部鈍圓。

　　（五）示范：若本人糞便中未檢到寄生蠕蟲卵，則以他人糞便中檢到的蟲卵玻片作為示范。