實驗動物的給藥途徑及取血方法
一、實驗動物的用藥途徑及方法
動物給藥的途徑和方法可根據動物種類、實驗目的和藥物而定,常用的方法簡介如下。
(一)經口給藥
有口服與灌胃兩種方法。口服法可將藥物放入飼料或溶于飲水中,使動物自行攝取。為保證劑量準確,應使用灌胃法,適用于小白鼠、大白鼠及家兔等動物。
1. 小鼠、大鼠(或豚鼠)灌胃時將灌胃針安在注射器上,吸入藥液。左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動物固定,右手持注射器,將灌胃針插入動物口中,用灌胃針管壓其上腭,使口腔和食道成一條直線,再沿咽后壁徐徐插入食管。針插入時應無阻力。若感到阻力或動物掙扎時,應拔出重插,以免損傷或穿破食管以及誤入氣管。
一般當灌胃針插入小鼠3~4cm,大鼠或豚鼠4~6cm后可將藥物注入。常用的灌胃量小鼠為0.2~1ml,大鼠1~4ml,豚鼠為1~5ml。
2. 猴、狗、貓、兔 灌胃時,先將動物固定,用特制的擴口器放入動物口中,并用繩將它固定于嘴部。將帶有彈性的橡皮導管(如導尿管),經擴口器上的小圓孔插入,沿咽后壁而進入食管。此時應檢查導管是否插入食管,可將導管外口置于一盛水的燒杯中,如不發生氣泡,即認為此導管是在食管中,即可將藥液灌入。灌胃完畢后,先拔出導尿管,再取下張口器。
各種動物一次灌胃能耐受的最大容積根據體重大小而不同:小鼠為0.5~1.0ml,大鼠為3~7ml,豚鼠為4~6ml,家兔為80~150ml,狗為200~500ml。
(二)注射給藥
1. 皮下注射 皮下注射給藥是將藥液推入皮下結締組織,經毛細血管、淋巴管吸收進入血液循環的過程。注射時,常規消毒注射部位皮膚,用左手拇指和食指提起皮膚,注射針頭取一鈍角角度刺入皮下,將針頭輕輕向左右擺動,易擺動則表示已刺入皮下,再輕輕抽吸,如無回血,可緩慢地將藥物注入皮下。
拔針時左手拇、食指捏住進針部位片刻,以防止藥物外漏。皮下注射部位一般大白鼠在側下腹部;豚鼠在后大腿內側或小腹部;兔在背部或耳根部注射;狗、貓多在大腿外側;蛙可在脊背部淋巴腔注射。
2. 皮內注射 是將藥液注入皮膚的表皮與真皮之間。此法可用于觀察皮膚血管的通透性變化或皮內反應,多用于接種、過敏實驗等。操作時須將注射的局部脫去被毛,常規消毒后,用左手拇指和食指按住皮膚并使之繃緊,在兩指之間,用注射器連4號小針頭,緊貼皮膚表層刺入皮內,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液,皮膚表面此時可見一白色小皮丘。
3. 肌肉注射 一般多選用臀部或股部肌肉發達、無大血管通過的部位,注射時將針頭迅速刺入肌肉,回抽無回血,即可進行注射。給大白鼠、小白鼠等小動物作肌肉注射時,用左手抓住鼠兩耳和頭部皮膚,右手取連有5號針頭的注射器,將針頭刺入大腿外側肌肉,將藥液注入。
4. 腹腔注射 常用于大鼠或小鼠給藥。用左手捕捉固定動物,使腹部向上,鼠頭略低于尾部,右手將注射針頭自下腹部靠近腹白線的兩側刺入皮下,使針頭向前推0.5~ 1.0cm,再以45°角穿過腹肌,緩緩注入藥液。為避免傷及內臟,可使動物處于頭低位,使內臟移向上腹。若實驗動物為家兔,進針部位為下腹部的腹白線離開1cm處。
5. 靜脈注射
(1)狗:狗靜脈注射多選用前肢內側頭靜脈或后肢小隱靜脈,注射前應先剪去注射部位的被毛,用膠帶扎緊靜脈近心端,使血管充盈,針尖自遠心端刺入血管,有回血后,固定針頭,徐徐注入藥液。
(2)家兔:一般選用外側耳緣靜脈。注射前應先拔去注射部位的被毛,用手指輕彈或輕揉兔耳,左手食指與中指夾住靜脈的近心端,阻止靜脈回流,使靜脈充盈,用拇指和無名指固定耳緣靜脈遠心端,右手持針盡量從遠端刺入,回抽有回血后用左手拇指固定針頭,放開食指和中指,將藥液注入。
(3)小鼠和大鼠:一般采用尾靜脈注射,鼠尾靜脈有3根,兩側及背側各一根,左右兩側尾靜脈較易固定,應優先選擇。注射前先將動物固定在鼠筒或玻璃罩內,使鼠尾露出,在45℃~50℃熱水中浸泡,或用酒精擦拭,使血管擴張。
用拇指和食指捏住尾根部,再以無名指和小指夾住尾端部,用中指從下托起尾巴固定,右手持注射器連4號細針頭,從尾下1/4處進針,如針確已在靜脈內,則注藥無阻,否則局部發白隆起,應拔出針頭再移向前方靜脈部位重新穿刺。
(4)蛙類:將蛙腦脊髓破壞后仰臥位固定于蛙板上,沿腹中線稍左剪開腹肌翻轉,可見腹靜脈緊貼腹壁肌肉下行,將針刺入即可。
6. 淋巴囊注射 蛙類皮下有數個淋巴囊,是蛙的給藥常用途徑,注射時應從口腔底部刺入肌層,再進入胸皮下淋巴囊注藥,抽針后藥液才不易流出。
此外,根據實驗內容的不同還可采取呼吸道給藥、皮膚給藥、脊髓腔內給藥、小腦延髓池給藥、直腸內給藥、關節腔內給藥。
二、實驗動物的取血方法
(一)大鼠、小鼠
1. 尾部取血 可采用針刺尾靜脈和剪尾尖兩種方法。
(1)針刺尾靜脈:先固定動物,用酒精棉球消毒尾部,然后對準尾尖部向上數厘米處的靜脈用注射針刺入后立即拔出。采血后用局部壓迫、燒烙等方法進行止血。
(2)剪尾尖:將動物固定或麻醉后,露出鼠尾,將尾巴置于45℃~50℃熱水中浸泡數分鐘,使血管擴張。擦干鼠尾后,將尾尖剪去1~2mm(小鼠)或5mm(大鼠)。從尾根部向尾尖部按摩,血即從斷端流出。
2. 眼部取血 可采用眼球后靜脈叢取血法。用7號針頭連接1ml的注射器或10ml長玻璃管(一端燒制拉成直徑1~1.5mm的毛細管)。取血時左手抓住鼠兩耳之間的皮膚使頭固定,輕輕壓迫頸部兩側,阻礙頭部靜脈回流,使眼球充分外突,球后靜脈叢充血。
右手持注射器或玻管,將其插入內眥部,向眼底方向旋轉插入。插入深度:小鼠為2~3mm,大鼠為4~5mm。因血壓關系,血液自行流入管內,拔出針頭或玻管,放松左手。為防止穿刺孔出血,可用紗布壓迫眼球,達到止血目的。數分鐘后可在同一穿刺孔重復取血。小鼠一次可采得血0.2ml,大鼠0.5ml。
3. 大血管取血 可采用頸動(靜)脈、股動(靜)脈、腹主動脈等方法取血。在這些部位取血均須麻醉后固定動物,然后作動(靜)脈分離手術,使其充分暴露,用注射器沿大血管平行方向刺入,抽取所需血量。或直接用剪刀剪斷大血管吸取,但切斷動脈時,要防止血液噴濺。
4. 心臟取血 先將動物仰臥固定,左手食指在左側第3~4肋間觸到心尖搏動最強處,右手用連有針頭的注射器在此穿刺。由于心臟跳動血液進入注射器。小鼠約0.5~0.6ml,大鼠約0.8~1.2ml。
5. 斷頭取血 這需要二人配合操作,采血者用左手將大(小)鼠的頭頸部握緊,右手抓住軀干和后肢,將頸部暴露。助手用剪刀將鼠頸剪斷(用力要大),采血者應迅速將大(小)鼠倒置,讓血滴入容器。此方法用于實驗結束后血液采集量大時。
(二)豚鼠
1. 耳緣剪口采血 將耳消毒后,用銳器割破耳緣,在切口邊緣涂抹20%枸櫞酸鈉溶液,阻止血凝,則血可自切口自動流出,進入盛器。操作時,使耳充血效果較好。此法能采血0.5ml左右。
2. 心臟采血 取血前應探明心臟搏動最強部位,通常在胸骨左緣的正中,選心跳最明顯的部位作穿刺。針頭宜稍細長些,以免發生手術后穿刺孔出血。因豚鼠身體較小,一般可不必將動物固定在解剖臺上,而可由助手握住前后肢進行采血。成年豚鼠采血應不超過10ml為宜。
3. 股動脈采血 將動物仰位固定在手術臺上,減去腹股溝區的毛,麻醉后局部用碘酒消毒。切開長約2~3cm的皮膚,使股動脈暴露及分離,然后用鑷子提起股動脈,遠端結扎,近端用止血鉗夾住,在動脈中央剪一小孔,用無菌玻璃小導管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放開止血鉗,血液既由導管流出。一次可采血10~20ml。
4. 背中足靜脈取血 固定動物,將其右或左后關節伸直,將動物腳背面用酒精消毒,找出背中足靜脈后,一手拉住豚鼠的趾端,一手用注射器刺入靜脈。拔針后立即出血,呈半球狀隆起。采取后應壓迫止血。
(三)家兔
1. 耳部取血 可采用耳緣靜脈或耳中央動脈取血。首先拔去血管表面皮膚的毛,輕揉兔耳或用酒精涂抹皮膚使血管擴張。用注射器可從耳中央動脈抽取數毫升血。也可用針頭刺破耳緣靜脈末梢取血。
2. 大血管取血 可采用頸靜脈、股靜脈和后肢小隱靜脈取血。
(1)頸靜脈和股靜脈取血:首先麻醉做血管分離術。然后用注射器沿血管方向刺入抽取血液。
(2)后肢小隱靜脈取血:首先使動物仰臥然后固定,在小腿上端扎橡皮管,小腿外側皮下可見充盈的靜脈,經皮穿刺可以取血。
3. 心臟取血 在第三肋間胸骨左緣3mm心臟搏動最強處,將針頭垂直刺入心臟,血即進入注射器。一次可取血20~25ml。
(四)狗和貓
1. 耳緣靜脈取血 采血量較少時可用此法。用針頭刺破靜脈采血或直接用空針抽取。
2. 前、后肢靜脈取血 前肢選用內側皮下頭靜脈,位于前肢前部,在下1/3處向內側走行;后肢選用外側的隱靜脈,位于跗關節外側,距跗關節上方5~10cm處的皮下,由前斜向后上方走行。采血時,先將狗固定,用止血帶扎住穿刺部位的上方,使靜脈充盈。操作者手持注射器采血。
3. 頸靜脈取血 此方法可取較多的血。先將狗麻醉固定,固定時將頸部盡量后仰,助手用手壓住頸靜脈入胸部的皮膚,使靜脈怒張。操作者用左手繃緊進針部位的皮膚,右手拿注射器沿血管向心端刺入。采血后應注意止血。
還可從狗的心臟或股動、靜脈采血。但技術要求較高,不容易成功,除非有特殊要求,否則可選用以上三種方法。
貓的取血方法與狗基本相似,可采用前肢皮下頭靜脈、后肢股靜脈、耳緣靜脈取血。采血量較大時,可從頸靜脈抽取。
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