PCR 擴增標本的HLA-DR基因 ? （一）擴增引物 HLA-DRB1基因擴增引物為：5’-CCGGATCCTTCGTGTCCCCACAGCACG-3’ 5’-TCGCCGCTGCACTGTGAAG-3’ ? （二）PCR擴增體系 （1）???????? 1.0uM 擴增引物 （2）???????? 300ng待測樣本基因組DNA （3）???????? 2.0U Taq多聚酶 （1）???????? 200uM 各種dNTP （2）???????? 用1 X PCR緩沖液（10mM Tris-HCl，pH8.3，50mM KCl，1.5mM MgCl2 ，0.01%明膠）調至總體積100ul，并用50ul礦物油覆蓋，防止水分蒸發。 ? （三）PCR擴增 （1） 采用下列PCR擴增條件進行擴增： 預變性：94℃，5分鐘 變性：? 94℃，30秒 退火：? 55℃，50秒 延伸：? 72℃，40秒 擴增循環數為33次 （2） PCR擴增完成后，取5ul進行瓊脂糖凝膠電泳檢查，上述引物擴增的產物長度為292bp。