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  • 實驗方法> RNA實驗技術> RNA原位雜交>五種不同的制備siRNA方法的比較

    五種不同的制備siRNA方法的比較

    關鍵詞: 制備 sirna 方法來源: 互聯網

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    比較項目 化學合成 體外轉錄 RNase III降解dsRNA siRNA 表達載體 PCR 表達框
    材料需求 21-mer RNA oligos(一對) 29-mer DNA oligos(一對) 轉錄模版 (200-1000bp,兩側帶T7 啟動子) 55-60-mer DNA oligos(一對) ~50-mer DNA oligos(一對)
    全部制備/合成時間所需時間 4天—2周 24 小時 + DNA oligo合成時間 1 天 + 轉錄模版制備時間 5天以上 + DNA oligo合成時間 ~ 6 小時 + DNA oligo合成時間
    個人所需操作時間 幾乎不需要* 中等 中等 中等
    是否需要驗證和尋找最有效siRNA 需要 需要 不需要 需要 需要
    能否標記siRNA (例如用于 熒光顯微鏡 分析siRNA進入細胞過程或者在細胞中的定位) 不能 不能
    轉染的相對難易程度
    可篩選性 (例如 抗生素 篩選) 不可以 不可以 不可以 可以 不可以
    能否用于長效抑制 不可以 不可以 不可以 可以( 抗生素 篩選) 不可以
    能否大規模制備 可以 有限 有限 可以 有限
    檢測總體轉染效率 不可以 不可以 不可以 可以 不可以
    每個基因的相對費用(不包含人力) 中等 中等 中等
    *取決于合成后是否包含純化、去保護,以及廠家提供的是已經退火的即用型雙鏈還是凍干的單鏈

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