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  • 實驗方法> RNA實驗技術> RNA原位雜交>富含多糖和次生代謝產物的白樺成熟葉中總RNA的提取

    富含多糖和次生代謝產物的白樺成熟葉中總RNA的提取

    關鍵詞: 多糖 和次生 代謝 產物來源: 互聯網

    植物生理學通訊 曾凡鎖 酚類物質是植物所特有的次生代謝物,它很容易被氧化成褐色的醌類物質,醌類物質與 RNA的不可逆結合,不僅會使RNA的活性喪失,而且在苯酚和氯仿抽提時還會使RNA丟失,因此富含次生代謝產物的植物RNA提取一直是RNA分析研究中的障礙。 要獲得完整性好的RNA,植物細胞破胞必須完全、迅速。細胞破碎不完全,不僅使RNA產量降低,而且還會因為植物細胞內部結構的破壞而產生內源性降解;時間過長則已釋放的RNA酶還有可能會產生活性而降解RNA。因此這是能否獲得高質量RNA的最為關鍵性的一步(王玉成 2002)。 其次則應考慮如何去除多糖。但CTAB法通常要結合其他操作才能有效去除多糖,常見的方法有低濃度乙醇沉淀法、醋酸鉀沉淀法、氯化鋰沉淀法、提高緩沖液的氯化鈉濃度等。其中用氯化鋰沉淀RNA是RNA提取中的常用方法,此法制備的RNA具有純度高和無多糖等 生物 大分子共沉淀等優點。

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