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  • 實驗方法> 生物化學技術> 化學生物學實驗技術>轉錄酶

    轉錄酶

    關鍵詞: 轉錄酶來源: 互聯網

    基因轉錄是以 DNA 為模板,在依賴于 DNA 的 RNA 聚合酶的催化作用下,將 4 種核苷酸合成 RNA 。 原核生物的 RNA 聚合酶的結構很相似。在真桿菌中只有一種,負責 mRNA 、 tRNA 和 rRNA 的合成。大腸桿菌 RNA 聚合酶由多個亞基組成,全酶 (holoenzyme) 是α 2 β ' βσ,相對分子質量約 480 000 。口亞基同全酶的結合不緊密,很容易解離下來。除去σ因子后剩下的部分稱為核心酶 ( α 2 ββ ') 。 利福霉素類藥物 (rifamycins) 和鏈霉溶菌素 (sheptolydigin) 通過與β亞基結合可抑制基因轉錄。σ因子即σ亞基的功能是使全酶識別啟動子并與之結合。大腸桿菌中只有一種 RNA 聚合酶,它要負責所有基因的轉錄,也就是要識別所有基因的啟動子。這項功能是由σ因子完成的。大腸桿菌至少有 4 種,因子:σ 28 、σ 39 、σ 54 和σ 70 ,在不同環境下使用不同的σ因子。如環境溫度升高時,σ 39 使熱激基因表達;缺少氮時,σ 54 使可利用其他氮源的相關基因轉錄。枯草桿菌中有約 10 種,因子。σ因子的替換使用,調控不同基因的表達,控制著生命周期中出現的變化。例如,在正常生命周期中和在被噬菌體感染時,使用不同的σ因子,識別不同基因的啟動子。

    真核生物有三種 RNA 聚合酶: RNA 聚合酶 I 、Ⅱ和Ⅲ,分別負責三類基因的轉錄。 RNA 聚合酶 I 定位在核仁,負責 rRNA 基因的轉錄。 RNA 聚合酶Ⅱ定位在核質,負責轉錄產生 mRNA 前體,即核不均一 RNA —— hnRNA(heterogeneousnuclear RNA) 。 RNA 聚合酶Ⅲ定位在胞質,負責 tRNA 、 5SRNA 、 Alu 序列和其他小 RNA 的生成。

    真核生物的 RNA 聚合酶的相對分子質量都比較大,在 5x105 以上,由 8 ~ 14 個亞基組成。葉綠體和線粒體的 RNA 聚合酶的活性較小,與細菌的 RNA 聚合酶更為相似,只負責轉錄為數不多的幾個特定的基因,沒有更復雜的功能。

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