問：想了解一下氨基酸的UV含量測定方法，是有關水蛭的！

答：建議參考腦蛋白水解物（有口服用、注射用兩種）的標準，測定“氨基氮”總量。我手里有口服用的標準（ws-xg-130-2002第16冊324頁）但沒有電子版的，我把氨基氮的測定法給你敲一遍吧：

本品每1g含總氮應為30～100mg，含氨基氮應為總氮的40％～50％。

氨基氮 取本品0.5g，精密稱定，置研缽中，加水30ml，研磨使充分溶解，用0.1mol/L鹽酸溶液或0.1mol/L氫氧化鈉溶液，調節pH值至7.0，然后加入預先調節pH值9.0的甲醛溶液10ml，攪勻，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液pH值為9.0，按加入甲醛溶液后所消耗的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）的量（ml）計算。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當與1.401mg的氨基氮。

答：OPA:O-pathaldialdehyde,即鄰苯二甲醛。強烈建議使用進口試劑（Sigma or Fluka）。OPA商品為固體粉末，溶液配制如下：10mgOPA粉末用0.1ml甲醇或乙醇溶解后加0.9ml 0.4N（pH 10.2）的硼酸緩沖液，然后加0.01ml的3－MPA（3－巰基丙酸），混合均勻后分裝保存！

注：1、OPA一旦配制為溶液后就很不穩定，容易被氧化，因此衍生過程中如有可能，通N2保護。

2、OPA氨基酸衍生化中，3－MPA是必須的。

3、硼酸溶液用10N的NaOH調節pH值。

4、衍生化反應在硼酸緩沖液體系中進行（樣品和硼酸溶液體積比為1：5），OPA的摩爾量控制為AA總量的5倍以上（保險值）。

答：我最近也在做全氨基酸分析,當然柱前衍生是最精確的方法,這包括OPA-FMOC聯用衍生、2,4－二硝基氟苯、Waters專利的AQC法衍生（Accq.Tag法）等。其中現在比較常用的是OPA-FMOC聯用衍生和AQC法衍生，前者衍生產物不穩定，后者主要是分析時間較長45-60之間吧（也可以控制在25分鐘以內）以及試劑包太貴了，當然你大量用的話還是可以降低成本的。

而且后者在AOAC上是被官方推薦使用的（原來只是用熒光檢測，后來發展用UV也可以檢測），其檢測靈敏度可達到pmol級，同OPA一樣，但其衍生物更加穩定，可以放置一周，在柱前衍生分析氨基酸的HPLC方法中，此方法除了時間要較其他方法長外，貴也是其特點之一，但做全氨基酸分析結果很好。因為你是要用于標準制定的，還是推薦使用你采用這個方法，畢竟還是經過AOAC官方認證的。