離心問題
關鍵詞: 離心問題來源: 互聯網
問:我要在腫瘤細胞中提取一種酶.按藥理實驗技術操作:PBS洗滌后的細胞加入TMN buffer(10mM Tris.HclPH7.5 ,1.5mM MgCl2,10mM NaCl),冰浴10min,加入 3% sarcosyl 后冰浴15min,時常振搖.2500 g離心20min,沉淀為絮狀,且溶液呈粘稠狀。無法去上清取沉淀。重復了幾次都是一樣的結果,我不知道怎么回事,請大家幫我分析一下。
答:是轉速太低,我從肝細胞中提取微粒體酶用了兩次離心,先用12000g,取上清液再用100000g取沉淀。
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