相關專題 ? 一、實驗目的 1．掌握淀粉的提取方法， 2．熟悉淀粉跟碘的反應和淀粉水解生成葡萄糖的反應。 二、實驗原理 淀粉主要由直鏈淀粉(約占20％)和支鏈淀粉(約占80％)組成。直鏈淀粉能溶于熱水，跟碘作用顯現藍色。支鏈淀粉不溶于水，但能在水中脹大而潤濕、跟碘作用顯現紫紅色。酸性氯化鈣溶液與磨細的含淀粉樣品共煮，可使淀粉輕度水解。同時鈣離子與淀粉分子 上的羥基絡合，這就使得淀粉分子充分地分散到溶液中，成為淀粉溶液。淀粉在稀酸作用下能發生水解，生成一系列產物，最后得到葡萄糖。 三、儀器和試劑 儀器 植物 樣品粉碎機、離心機、分析天平、粗天平、量筒、三角瓶；分樣篩(100目)、布氏漏斗、抽濾瓶及真空泵、離心管、小電爐；燒杯、三腳架、石棉網、滴管。 試劑 1 .乙醚 2. 80%的乙醇 3. 含有氯化汞的乙醇溶液 4. 醋酸氯化鈣溶液 5. 30％ZnSO4 6. 15％K4Fe(CN) 7. 95％乙醇 8. 淀粉 9. 碘溶液(碘酒或碘化鉀的碘溶液) 10. 稀硫酸(1:5) 11. 碳酸鈉 12. 紅色石蕊試紙 13. 氫氧化鈉溶液(5％) 14. 硫酸銅溶液(2％) 15. 斐林試劑 四、操作步驟 (一)淀粉的提取 1.樣品準備 (1)稱取樣品：將樣品風干、研磨、通過100目篩，精確稱取約2.5g 樣品細粉(要求含淀粉約2g，請參考附注估計)，置于離心管內。 (2)脫脂：加乙醚數mL 到離心管內，用細玻棒充分攪拌，然后離心。傾出上清液并收集以備回收乙醚。重復脫脂數次，以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在會使以后淀粉溶液的過濾困難。大多數谷物樣品含脂肪較少，可免去這個脫脂手續。 (3)抑制酶活性：加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到離心管內，充分攪拌，然后離心，傾去上清液，得到殘余物。 (4)脫糖：加80％乙醇10mL 到離心管中，充分攪拌以洗滌殘余物(每次都用同一玻棒)，離心，傾去下清液。重復洗滌數次以去除可溶性糖分。 2.溶提淀粉 (1)加醋酸－氯化鈣：先用醋酸氯化鈣溶液約10mL 加到離心管中，攪拌后全部傾入250mL 三角瓶內，再用醋酸氯化鈣溶液50mL 分數次洗滌離心管，洗滌液并入三角瓶內，攪拌玻棒也轉移到三角瓶內。 (2)煮沸溶解：先用蠟筆標記液面高度，直接置于加有石棉網的小電爐上，在4min～5min 內迅速煮沸，保持沸騰15min～17min，立即將三角瓶取下，置流水中冷卻。煮沸過程中要時加攪拌，勿令燒焦；要調節溫度，勿使泡沫涌出瓶外；常用玻璃將瓶側的細粒擦下；并加水保持液面高度。 3.沉淀雜質和定容 (1)加沉淀劑：將三角瓶內的水解液轉入100mL 容量瓶，用醋酸氯化鈣溶液充分洗滌三角瓶瓶，并入容量內，加30％ZnSO41mL 混合后，再加15％K4Fe(CN)61mL，用水稀釋至接近刻度時，加95％乙醇一滴以破壞泡沫，然后稀釋到刻度，充分混合，靜置，以使蛋白充分沉淀。 (2)濾清：用布氏漏斗(加一層濾紙)吸氣過濾。先傾清溶液約10mL 于此濾紙上，使其完全濕潤， 讓溶液流干，棄去濾液，再傾清溶液進行過濾，用干燥的容器接受此濾液，收集約50mL，即可供測定之用。 (二)淀粉性質的測定 1.淀粉跟碘的反應： 在一個試管里加入1mL 制備好的淀粉溶液，然后加如1滴碘液，淀粉溶液立即會顯深藍色。加熱，顏色褪去，冷卻，藍色又出現。 2.淀粉的水解：加 40mL 淀粉溶液于燒杯中，再加稀硫酸 1mL，煮沸5分鐘，取出1mL 熱溶液放在試管里，使其迅速冷卻，滴入1滴碘溶液，出現藍紫色。以后每隔2min 取一次試樣檢驗，共計五次，可以看到不同大小的糊精顆粒對碘溶液顯現紫紅色、橙紅色、橙黃色及黃色。 3.把已經水解的淀粉溶液用碳酸鈉中和硫酸，使溶液略顯堿性。取出1mL，加入盛有斐林試劑的(甲和乙各3mL 的混和液)試管里，搖和均勻，加熱煮沸，即有紅色氧化亞銅沉淀生。