分離防御素

關鍵詞： 分離防御素來源：互聯網

1．????? 試劑：30％的醋酸，3只spectra/por管，HNP－3多克隆抗體，液氮 2．????? 器械和設備：超聲破碎儀，離心管，離心機，4度的冰箱，bicinchoninic酸蛋白測定系統，液氮儀，S－200HR柱，S－200HR柱，tricineSDS-PAGE,AU-PAGE及激光測定取來在COPD病人50毫升膿痰液超聲破碎3次，1分每次（幅度？） 30％的醋酸定容至100毫升，置于4度的冰箱中濃縮過夜離心，27000轉，20分鐘（去除雜質）真空蒸汽泵濃縮至10毫升（時間？） 5%醋酸溶于3只spectra/por管中，置于4度的冰箱中過夜(用against而不用with？) 提取物離心540轉，10分鐘上清夜用S－200HR柱進行凝膠過濾（2.5×100cm，濾前用5％的醋酸平衡）收集10毫升濾液兔子抗HNP－3多克隆抗體進行ELISA（鑒定是否存在defensins）使用SDS-PAGE純化（減少的情況）?? 12.5%酸環境的AU-PAGE 使用真空泵濃縮用bicinchoninic酸蛋白測定系統對濃縮蛋白進行測量液氮中嗜酸性粒細胞崩解離心去除細胞碎片(轉速？時間？) postnuclear上清夜離心27000轉，20分鐘加入5％的醋酸溶液形成顆粒提取物用S-200HR柱（4.8×105cm）過濾（時間？）含有HNP-3的部分使用RP-HPLC作進一步的純化(柱C18，4.6*250mm) 沉淀使用tricineSDS-PAGE,AU-PAGE及激光測定使用Limulus測定defensins中LPS成分（HNP－1，2，3大約100微克每毫升，呼吸道細胞100匹克每毫升 (責任編輯：大漢昆侖王)

推薦方法