QuantiTect Reverse Transcription Kit試劑盒

QuantiTect Transcription Kit試劑盒快速合成cDNA，進行兩步法real-time RT-PCR，用于基因表達分析

• cDNA合成和gDNA去除僅用20分鐘完成

• 即便是低豐度的轉錄本也能獲得高產量的cDNA

• 轉錄本的5'和3'端區域都可以進行cDNA合成

• 無需設計RNA特異性引物或探針

QuantiTect Reverse Transcription Kit通過方便快速的操作過程進行cDNA合成，并有效去除基因組DNA。應用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA樣本中的基因組DNA污染。QuantiTect Reverse Transcription Kit提供所有快速、高效逆轉錄所需的組分，包括Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和獨特的RT Primer Mix。合成的cDNA經過優化可用于real-time PCR，實現對mRNA轉錄本所有區域的靶分子進行可靠的定量檢測。

性能

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit，基因組DNA污染物可使用獨特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。去除基因組DNA對于準確的基因表達結果非常重要，而并不總是可以設計RNA特異性引物或探針。使用gDNA Wipeout Buffer可節省時間和費用，因為純化RNA樣品過程中或純化后均無需另外采用DNase消化。

Quantiscript Reverse Transcriptase的高RNA親和性配合Quantiscript RT Buffer可從各種RNA模板中獲得高產量cDNA（見表“低豐度轉錄本可獲得較高產量的cDNA”）。即使復雜的模板也能成功逆轉錄，如GC含量高或有復雜二級結構的模板。

RT Primer Mix包含有特別優化的oligo-dT和隨機引物的混合物，使cDNA合成可從RNA轉錄本的各個區域起始，甚至可從5'區域開始。與其他供應商提供的試劑盒相比，QuantiTect Reverse Transcription Kit為real-time PCR分析提供高產量的cDNA，無需考慮待擴增目標序列位于轉錄本的哪個區域，檢測低豐度的基因也具有更高靈敏度。同時，QuantiTect Reverse Transcription Kit也確保了real-time RT-PCR結果更好的重復性。

原理

QuantiTect Reverse Transcriptase是Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases的新型混合物，對RNA具有高親和性，可從各種含量的RNA（10 pg到1 μg）合成cDNA。與其他供應商提供的試劑盒相比，QuantiTect Reverse Transcription Kit為real-time PCR分析提供高產量的cDNA，無需考慮待擴增目標序列位于轉錄本的哪個區域。即使復雜的模板也能成功逆轉錄，如GC含量高或有復雜二級結構的模板。QuantiTect RT Buffer已經過優化，可與real-time PCR緩沖液兼容。

為獲得準確的real-time RT-PCR基因表達分析結果，很重要的是僅擴增和檢測cDNA。基因組DNA的干擾可通過設計橫跨外顯子/外顯子邊界的引物或探針避免。盡管如此，在某些特殊情況下（如：cDNA來自一個單外顯子基因），起始RNA樣品必須無基因組DNA。使用QuantiTect Reverse Transcription Kit，基因組DNA污染物可使用獨特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。使用gDNA Wipeout Buffer可節省時間和費用，因為純化RNA樣品過程中或純化后均無需另外采用DNase消化。另外，不需要設計RNA特異性引物或探針。

操作流程

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit可在20分鐘內去除基因組DNA和合成cDNA。由于兩個反應均在同一孵育溫度并使用預混液構建反應，因此操作過程快速且方便。

QuantiTect Reverse Transcription Kit包括快速合成cDNA所需的所有組分。純化的RNA只需簡單地與gDNA Wipeout Buffer孵育，即可有效去除污染的基因組DNA。與其他的方法相比，使用Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和RT Primer Mix制備的預混液可將RNA樣品直接進行逆轉錄。使用Quantiscript Reverse Transcriptase，即使具有復雜的二級結構的RNA也可在低溫下轉錄，確保RNA保持完整：整個反應都在42°C下完成，并在95°C失活。不需要RNA變性、引物退火和RNase H消化。

應用

QuantiTect Reverse Transcription Kit可從各種類型的起始樣本中合成cDNA，以實現高效和高靈敏度的real-time RT-PCR。樣本類型包括激光顯微切割樣本和活組織切片。

QuantiTect Transcription Kit試劑盒

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注：該產品未在中華人民共和國食品藥品監督管理部門申請醫療器械注冊和備案，不可用于臨床診斷或治療等相關用途