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TMT標記定量是蛋白質組學多重定量分析研究中使用最廣泛、也是
功能最強大的研究策略,有實驗周期短、檢測通量高、缺失值少等
優點,目前TMT標記已經可以同時完成最多18個樣品的定性定量。
這項技術面臨的主要挑戰為,共隔離肽段的干擾和MS2譜圖中共碎
裂導致定量精度的折損。為了解決這一挑戰,在Orbitrap Fusion和
Orbitrap Fusion Lumos “三合一”系列質譜SPS-MS3方法的基礎
上,賽默飛基于2019年新推出的Orbitrap Eclipse質譜,開發了一種
稱為RTS-SPS-MS3(RTS,Real Time Search,實時檢索)[1]的新
技術。
本文中,我們借助Thermo Scientific? Pierce? TMT11plex yeast酶
解肽段標準品、摻入6種蛋白質消化物的TMT10plex標記的細胞或
血漿樣品、酵母和去高豐度血漿混合樣品,評估了Orbitrap Eclipse
質譜儀特有的RTS-SPS-MS3 TMT定量方法的通量和定量準確度。