提高紅細胞代謝組LC/MS 檢測覆蓋率的樣品提取和色譜策略

Sana TR, Waddell K, Fischer SM.J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2008 Aug 15; 871(2): 314-21.Epub 2008 Apr 26.

摘要：從生物基質中對物理化學性質差異巨大的代謝物進行可重復而全面的樣品提取和檢測，是一個極具挑戰性的過程。我們建立了一種單獨的LC/MS 分離方法，采用2.1 mm x 100 mm, 1.8 微米ZORBAX SB-Aq 柱分離人紅細胞代謝物，樣品提取溶劑pH 為中性，或調節至pH 2、6 或9。為了追蹤樣品提取效率，添加了內標進行評價。通過正(+) 負(-) 離子模式電噴霧電離(ESI) 和大氣壓電離(APCI) 技術聯用，在各pH 條件下共檢測出2370 個特征離子(化合物及相關組分：同位素、加合體和二聚體)。在下列條件下檢測到的代謝組覆蓋較寬：(1) pH 2 和9，總的特征離子比單獨pH 7 條件下檢測到的特征離子增加了92%;(2) 所有pH 下聯用APCI 可使檢測到的特征離子比單用ESI 檢測的總數增加34%。可以看出，提取溶劑pH 對原血紅素和其它化合物有明顯影響，指出代謝譜實驗中需要采用全面的樣品提取策略并進行LC/MS 分析。