葡萄果實中多酚的快速分離液相色譜/質譜檢測和定量

Cavaliere C, Foglia P, Gubbiotti R, Sacchetti P, Samperi R,Laganà A.Rapid Commun Mass Spectrom. 2008 Oct;22(20):3089-99.

摘要：建立了葡萄皮和葡萄籽中多酚的快速分離液相色譜/質譜(RRLC/MS) 檢測和定量方法。無果肉葡萄皮用液氮處理，并研磨;對葡萄籽也進行研磨。然后取3 g 樣品用30 mL 甲醇/水/甲酸70:30:1 (v/v/v) 超聲下提取，將1 微升最終提取物注入兩根串聯的100 x 2.1 mm 內徑，1.8 微米Zorbax Eclipseplus C18 柱中。用酸化的乙腈/甲醇50:50 (v/v) /水進行梯度洗脫，對化合物進行分離。柱溫恒定在70 °C。用配置電噴霧離子源的安捷倫6410 三重串聯四極桿質譜儀進行質譜分析。采用正離子和負離子MS/MS 子離子掃描進行化合物鑒定，采用m/z 范圍200-1400 的正離子全掃描質譜進行定量。通過對質譜圖進行比對，鑒定出了多種黃酮醇、黃烷-3-醇、花青素和芪類化合物。用外標法進行定量，濃度值扣除了基質效應，基質效應由其它實驗檢測。對沒有市售標準品的化合物進行了半定量測定。回收率為90-102%，相對標準偏差(RSD) <5%，樣品之間的RSD 為4-12%。用兩種代用標準品進行質量控制。用上述方法比較了三種成熟期和貯存6 周的釀酒葡萄中的多酚的含量。結果顯示，貯存過程中多酚含量減少了一半。