用LC/TOF-MS 對培養基和干無花果培養真菌的二級代謝物進行快速分析

Senyuva HZ, Gilbert J, Oztürko lu S.Anal Chim Acta. 2008 Jun 9; 617(1-2): 97-106. Epub 2008 Jan 16.

摘要：建立了液相色譜-飛行時間質譜(LC/TOF-MS) 分析真菌代謝譜的方法。通過向空白培養基中添加黃曲霉素、赭曲霉素、單端孢霉烯族毒素和其它代謝物，考察了方法的質量準確度、選擇性(特異性)和重現性。經過提取和LC/TOFMS 分析后，用一個專門構建的含465 個二級代謝物的數據庫對標準品進行了正確鑒定。用在各種培養基上生長7-14 天的11 種產毒真菌和4 種非產毒真菌驗證了方法的可行性。還用本法檢測了兩種在? 射線照射滅菌的干無花果中培養7-14 天的產毒真菌A.flavus (200-138) 和A.parasiticus (2999-465)。取附帶部分培養基或干無花果的菌絲樣品，用溶劑法提取，然后用快速分離微徑LC 柱進行LC/TOF-MS 分析。數據用聚類分析進行處理，結果表明，用電噴霧(ESI)-TOF-MS 可以對粗提的代謝物進行明確鑒定。采用基礎代謝物數據庫，可以鑒定培養基分離液中的預期代謝物。方法快速而簡便，可用于每日監測滅菌無花果中這些代謝物的濃度。在14 天當中，黃曲霉素和曲酸在5-6 天時達到最大值，而5-甲氧基柄曲霉素則保持相對恒定。除了預計產生的已知代謝物，還鑒定出了異煙棒曲霉素A、煙曲霉素、煙曲霉文B、畸形素(多肽)、曲霉酸、土曲菌酮、青地霉素和青霉酸。